产品货号：
BTN16-53710
中文名称：
通用型酵母菌属LAMP检测试剂盒
英文名称：
Saccharomyces spp. LAMP Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒基于LAMP技术检测酵母菌属，特异性比PCR高，因为LAMP扩增使用4-6条引物而不是两条。试剂盒里的4×LAMP MagicMix含可见光和荧光染料，既可以用金属浴和水浴扩增用可见光肉眼判断结果，也可用荧光PCR仪进行实时荧光检测。
酵母菌属(Saccharomyces)是一种单细胞生物重要真菌，可在缺氧环境中生存，主要生长在偏酸性的潮湿的含糖环境中，也是人类直接食用量最大的一种微生物。酵母菌体含有丰富的蛋白质、脂肪、糖分和B族维生素以及中间产物，能提高发酵食品的营养价值，使制品疏松，改善食品风味，也具有保护肝脏、解毒、抗衰老、抗肿瘤、预防动脉硬化、提高人体的免疫力等功能。酵母也是引起食物变质得优势菌种，因此快速检测酵母菌属具有重要意义。
试剂盒特点：
1．一般60分钟内出结果（取决于靶分子浓度），比PCR快约1小时。
2．对20μL的反应体系，最大样品加样量达到14μL。
3．内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
4．假阴性率低。
5．提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。
6．只可用于科研，只可进行定性检测，不能用于定量检测。
7．本产品只适用于LAMP检测，不适用于进行RT-LAMP检测。
8．本产品足够50次20μL体系的LAMP扩增和检测反应。
试剂盒组成：
保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照最好单独放置，不要污染其他试剂。
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化样品DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个样品制备，包括一个样品制备阳性对照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂盒决定。如果样品使用量为XmL，则在XmL水中加10μL试剂盒提供的阳性对照（1万拷贝），样品制备阴性对照是直接用X mL水作为阴性对照，然后和N个样品一起进行DNA提取操作，得到N+2个DNA样品。
二、双染料LAMP扩增及检测（20μL体系）
3．反应设置：如果有N+2个DNA纯化样品，则最好设置N+4个LAMP扩增，增加LAMP阴性对照和LAMP阳性对照各1个。在N+4个0.2mL PCR管中加入下列成分：
4．置混匀后进行扩增。由于本产品含双染料，可以根据实验室条件选择下列两种方式进行扩增和检测。
5．如果使用金属浴或水浴，则必须先在每个反应管中加30μL石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，影响反应效率。65℃保温120分钟。
6．如果使用荧光定量PCR仪：设聚合温度65℃，1次循环1分钟，120个循环，每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。
三、结果分析及解读
7．如果是用水浴或金属浴进行的扩增，反应结束后只能肉眼判断结果。将反应管放置在白色背景（如白纸）前观察。扩增阳性对照管内反应液将呈现蓝色，无模板和无引物的阴性对照将呈浅蓝色。如果扩增阳性对照管内反应液不呈现蓝色，或无模板和无引物的阴性对照任何一个呈现蓝色，则说明试剂有问题，实验无效。请跟我司联系。
8．如果实验有效，则样品管的颜色接近扩增阳性对照管则说明有扩增，如果接近无模板和无引物的阴性对照，则说明无扩增。反应结果示例如下（9为阴性，10为阳性）：
9．反应结束后，如是用荧光PCR仪扩增，则可分析扩增曲线和Ct。试剂盒提供的阳性对照的Ct将小于60，如果大于60，说明试剂可能失效，需跟厂家联系。无模板阴性对照和无引物阴性对照的Ct将大于120。如果任何小于60，则说明试剂或环境被污染，需重复实验或跟厂家联系。如果对照结果正常，说明实验有效，再分析样品。样品的Ct在60以下的为阳性，90以上的为阴性，60-90之间的为疑难样品，需要重复一次，如果还在60-90，需要电泳检测。
10．当实时荧光检测和可视化检测同时使用时，如果不一致，以实时荧光LAMP的数据为准。一般可视化结果滞后实时荧光检测结果20-30分钟，也就是说，在qPCR仪上第30分钟时呈现阳性的样品，其颜色变化在第50-60分钟时才能观察到。
相关搜索：通用型酵母菌属LAMP检测试剂盒，通用型Yeast检测试剂盒，Saccharomyces spp. LAMP Kit
酵母菌属(Saccharomyces)是一种单细胞生物重要真菌，可在缺氧环境中生存，主要生长在偏酸性的潮湿的含糖环境中，也是人类直接食用量最大的一种微生物。酵母菌体含有丰富的蛋白质、脂肪、糖分和B族维生素以及中间产物，能提高发酵食品的营养价值，使制品疏松，改善食品风味，也具有保护肝脏、解毒、抗衰老、抗肿瘤、预防动脉硬化、提高人体的免疫力等功能。酵母也是引起食物变质得优势菌种，因此快速检测酵母菌属具有重要意义。
试剂盒特点：
1．一般60分钟内出结果（取决于靶分子浓度），比PCR快约1小时。
2．对20μL的反应体系，最大样品加样量达到14μL。
3．内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
4．假阴性率低。
5．提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。
6．只可用于科研，只可进行定性检测，不能用于定量检测。
7．本产品只适用于LAMP检测，不适用于进行RT-LAMP检测。
8．本产品足够50次20μL体系的LAMP扩增和检测反应。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| 4×双染料LAMP MagicMix | 250μL |
| 20×酵母菌属通用LAMP引物混合液 | 50μL |
| 酵母菌属通用LAMP阳性对照（1×103拷贝/μL） | 150μL |
| 超纯水 | 1mL |
保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照最好单独放置，不要污染其他试剂。
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化样品DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个样品制备，包括一个样品制备阳性对照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。样品使用量根据所选择的试剂盒决定。如果样品使用量为XmL，则在XmL水中加10μL试剂盒提供的阳性对照（1万拷贝），样品制备阴性对照是直接用X mL水作为阴性对照，然后和N个样品一起进行DNA提取操作，得到N+2个DNA样品。
二、双染料LAMP扩增及检测（20μL体系）
3．反应设置：如果有N+2个DNA纯化样品，则最好设置N+4个LAMP扩增，增加LAMP阴性对照和LAMP阳性对照各1个。在N+4个0.2mL PCR管中加入下列成分：
| 成分 | N+2个样品管 | LAMP阴性对照 | LAMP阳性对照 |
| 4×双染料LAMP MagicMix | 5μL | 5μL | 5μL |
| 20×酵母菌属通用LAMP引物混合液 | 1μL | 1μL | 1μL |
| N+2个样品DNA | 14μL | - | - |
| 超纯水 | - | 14μL | 4μL |
| 酵母菌属通用LAMP阳性对照（1×103拷贝/μL） | - | - | 10μL |
4．置混匀后进行扩增。由于本产品含双染料，可以根据实验室条件选择下列两种方式进行扩增和检测。
5．如果使用金属浴或水浴，则必须先在每个反应管中加30μL石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，影响反应效率。65℃保温120分钟。
6．如果使用荧光定量PCR仪：设聚合温度65℃，1次循环1分钟，120个循环，每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。
三、结果分析及解读
7．如果是用水浴或金属浴进行的扩增，反应结束后只能肉眼判断结果。将反应管放置在白色背景（如白纸）前观察。扩增阳性对照管内反应液将呈现蓝色，无模板和无引物的阴性对照将呈浅蓝色。如果扩增阳性对照管内反应液不呈现蓝色，或无模板和无引物的阴性对照任何一个呈现蓝色，则说明试剂有问题，实验无效。请跟我司联系。
8．如果实验有效，则样品管的颜色接近扩增阳性对照管则说明有扩增，如果接近无模板和无引物的阴性对照，则说明无扩增。反应结果示例如下（9为阴性，10为阳性）：
9．反应结束后，如是用荧光PCR仪扩增，则可分析扩增曲线和Ct。试剂盒提供的阳性对照的Ct将小于60，如果大于60，说明试剂可能失效，需跟厂家联系。无模板阴性对照和无引物阴性对照的Ct将大于120。如果任何小于60，则说明试剂或环境被污染，需重复实验或跟厂家联系。如果对照结果正常，说明实验有效，再分析样品。样品的Ct在60以下的为阳性，90以上的为阴性，60-90之间的为疑难样品，需要重复一次，如果还在60-90，需要电泳检测。
10．当实时荧光检测和可视化检测同时使用时，如果不一致，以实时荧光LAMP的数据为准。一般可视化结果滞后实时荧光检测结果20-30分钟，也就是说，在qPCR仪上第30分钟时呈现阳性的样品，其颜色变化在第50-60分钟时才能观察到。
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